COVID-19 核酸 RT-PCR 檢測(cè)：樣品制備工具

SARS-Cov-2 核酸擴(kuò)增試驗(yàn) (NAAT) 是一種實(shí)時(shí)檢測(cè)，旨在對(duì)上呼吸道標(biāo)本（如鼻、鼻咽、口咽拭子標(biāo)本）中的 SARS-CoV-2 病毒 RNA 進(jìn)行定性檢測(cè)。以下文章概述了 NAAT 樣品制備以及每個(gè)階段所需的工具和設(shè)備。

COVID-19 RT-PCR 檢測(cè)樣品制備階段： 正確的樣本采集、處理和制備對(duì) RT-PCR 檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性有很大影響。

標(biāo)本滅活

可使用干浴培養(yǎng)箱在 56°C 下使標(biāo)本失活。四個(gè)E 干浴培養(yǎng)箱 其可拆卸模塊適用于不同的試管，是滅活的理想選擇。許多公司都提供可以滅活核酸的 VTM 緩沖液。有關(guān)此類(lèi)滅活試劑盒的更多信息，請(qǐng) 聯(lián)系我們.

RNA提取

核酸需要從滅活的樣本中分離出來(lái)。核酸提取通過(guò)三個(gè)關(guān)鍵過(guò)程：裂解、洗滌/純化（如果是使用磁珠提取等固相提取方法則為洗脫）。在細(xì)胞裂解中，裂解試劑用于促進(jìn)細(xì)胞破裂和釋放核酸。然后使用洗滌緩沖液去除蛋白質(zhì)、多糖和脂質(zhì)等污染物，從而純化 RNA。如果磁珠等固相載體用于結(jié)合核酸，則使用洗脫緩沖液。細(xì)胞懸浮液與裂解試劑的徹底混合是通過(guò)使用 旋渦混合器.在液相提取中，一旦樣品進(jìn)行離心，就可以從上清液中吸取 RNA。四個(gè)E 高速微量離心機(jī) 最大 rpm 為 15,000 是該過(guò)程的理想選擇。

與所有分子生物學(xué)應(yīng)用一樣，無(wú) RNAse/DNAse 吸管吸頭 移液需要 RNA，因?yàn)?RNA 會(huì)很快被酶（如 RNAse）破壞。這 沉淀物^TM值 移液器系列 來(lái)自 Four E's Scientific 的移液器采用人體工程學(xué)設(shè)計(jì)，可實(shí)現(xiàn)無(wú)疲勞移液，旨在提供最高水平的精確度和準(zhǔn)確度。

對(duì)于高通量核酸提取，可以使用基于磁珠提取技術(shù)的自動(dòng)提取器。四個(gè) E 提供兩個(gè)自動(dòng)提取器 多效 032 和 多效 096 分別提供 32 和 96 個(gè)樣本的最大提取通量。自動(dòng)化系統(tǒng)整合了結(jié)合、混合、洗滌、洗脫等所有純化階段，實(shí)現(xiàn)高效、高質(zhì)量的純化。該系統(tǒng)可與任何預(yù)填充的基于磁珠的試劑盒配合使用。

qPCR 設(shè)置

現(xiàn)在需要將提取的 RNA 添加到帶有 qPCR 試劑混合物的 PCR 管中。PCR 主混合物將包括逆轉(zhuǎn)錄混合物、PCR 酶、引物和探針。 PCR管 和 移液器 用于制備主混合物。取標(biāo)本N+2管RT-PCR混合液，加入提取的供試品RNA、提取的陽(yáng)性對(duì)照RNA和陰性對(duì)照。蓋上蓋子，充分混合，然后用 迷你離心機(jī).將反應(yīng)管放入 定量PCR儀 并按照 qPCR 試劑供應(yīng)商推薦的 qPCR 協(xié)??議進(jìn)行操作。四個(gè) E 提供一系列 qPCR 儀器 每次運(yùn)行的最大吞吐量為 16、48 和 96 個(gè)樣本。

請(qǐng)?zhí)峁┯嘘P(guān) COVID-19 測(cè)試或任何分子生物學(xué)應(yīng)用所需工具的更多詳細(xì)信息 聯(lián)系我們.

請(qǐng)注意：使用 RT-PCR 檢測(cè)試劑盒進(jìn)行的 COVID-19 核酸擴(kuò)增檢測(cè)旨在供受過(guò)實(shí)時(shí) PCR 和體外診斷程序技術(shù)指導(dǎo)和培訓(xùn)的合格臨床實(shí)驗(yàn)室人員使用。